| 睾丸表达新基因HSD-28的克隆及其编码蛋白质的研究 |
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| 引用本文：张宁,王勇,陈迎春,吴宁,缪时英,王琳芳.睾丸表达新基因HSD-28的克隆及其编码蛋白质的研究[J].医学研究杂志,2008,(12): |
| DOI：
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| 张宁 王勇 陈迎春 吴宁 缪时英 王琳芳 |
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| 基金项目:国家重点基础研究发展项目(973计划)
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| 中文摘要:目的 研究从人初级精母细胞特异EST文库中克降的新基因HSD-28及编码蛋白质在精子发生过程中的表达及可能发挥的功能.方法 利用根据本实验室构建的人初级精母细胞特异EST文库,通过电子克隆方法,从网络数据库资源获取基因HSD-28.纯化原核表达系统表达的HSD-28蛋白,以此免疫新西兰白兔制备针对HSD-28的特异性多克隆抗体.采用免疫组化的方法研究HSD-28在人睾丸组织中的表达定位.最后,利用酵母舣杂交系统筛选与HSD-28相互作用的蛋白质.结果 克隆得到了的HSD-28基因,提交GenBank获得登陆号为AY251533,全长为641个碱基,其中开放阅读框为504碱基,编码一个由168个氨基酸构成的蛋白质,命名为HSD-28蛋白.将构建的pET-30a-HSD-28重组质粒转化到BL21(DE3)宿主菌,表达并纯化了HSD-28蛋白,大小约为28kDa.免疫组织化学结果显示,HSD-28蛋白特异的定位于人精原细胞和早期初级精母细胞.筛选得到与HSD-28相互作用的两个阳性克隆45#和106#.结论 从人睾丸cDNA文库中成功克隆得到HSD-28基因,其编码蛋白质表达定位于人精原细胞和初级精母细胞中,可能参与精子发生过程中减数分裂的调节. |
| 中文关键词:精原细胞 初级精母细胞 减数分裂 |
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| Characterization of a Novel Human Testis-specific Gene,HSD-28 and Its Encoding Protein |
| Zhang Ning Wang Yong Chen Yingchun Wu Ning Miao Shiying Wang Linfang |
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| keywords:HSD-28 |
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