| 膜联蛋白V的异硫氰酸荧光素标记和应用研究 |
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| 引用本文：蔡炯,李方,牛娜,王世真.膜联蛋白V的异硫氰酸荧光素标记和应用研究[J].医学研究杂志,2008,(12): |
| DOI：
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| 蔡炯 李方 牛娜 王世真 |
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| 基金项目:国家自然科学基金
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霍英东肺癌专项基金
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| 中文摘要:目的 制备一种新型的膜联蛋白V,用异硫氰酸荧光素进行标记,观察它对外露磷脂酰丝氨酸(PS)红细胞的荧光染色情况.方法 带有金属螫合位点的膜联蛋白V通过毕赤酵母的培养和甲醇诱导表达获得,膜联蛋白V粗品通过离子交换和硫酸铵沉淀得到纯化产物.在硼酸盐缓冲液完成膜联蛋白V的异硫氰酸荧光素标记,标记产物经过离子交换进行纯化.红细胞经过戊二醛处理后Ps外露于细胞表面.在荧光显微镜下观察异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V对外露PS红细胞的结合.结果 毕赤酵母重组表达的新型膜联蛋白V经过离子交换和硫酸铵沉淀后得以纯化和浓缩.经过异硫氰酸荧光素进行标记后观察到它对外露PS红细胞的结合.结论 毕赤酵母系统重组表达的膜联蛋白V具有结合外露PS红细胞的能力,可以应用于细胞凋亡的体外检测. |
| 中文关键词:膜联蛋白V 异硫氰睃荧光素 毕赤酵母 磷脂酰丝氨酸 |
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| The Conjugation of Fluorescein Isothiocyanate to Annexin V and its Application. |
| Cai Jiong Li Fang Niu Na Wang Shizhen |
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