| 单纯疱疹病毒2型ICP4基因荧光实时定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文：刘继峰,关翠萍,唐旭,徐田红,许爱娥.单纯疱疹病毒2型ICP4基因荧光实时定量PCR检测方法的建立[J].医学研究杂志,2008,(12): |
| DOI：
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| 刘继峰 关翠萍 唐旭 徐田红 许爱娥 |
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| 基金项目:浙江省自然科学基金
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| 中文摘要:目的 建立实时荧光PCR定量检测单纯疱疹病毒2型(HSV2)ICP4基因的方法.方法 依据HSV2 ICP4基因序列设计引物.PCR纯化后克隆到pMD-18T载体上进行测序,抽提重组质粒作为标准品.根据测序结果设计荧光定最PCR的引物和探针,质粒标准品10倍稀释后进行扩增,建立标准曲线,并进行灵敏度和可靠性分析.结果 测序结果显示在扩增的PCR片段中有在A-G无和T-C的无义突变.标准品101以下没有检测信号,101具有明确的检测信号,因而检测的灵敏度为10.可靠性测定结果:107-101进行10次重复Ct值的平均值分别为14.275±0.137、17.988±0.162、22.081±0.259、25.957±0.345、29.565±0.203、33.269±0.287、37.737±0.698,变异系数分别为0.965%、0.902%、1.174%、1.329%、0.686%、0.862%、1.851%.Ct值与标准品浓度的对数之间存在良好的线性关系.回归系数为0.998.结论 成功建立了HSV2 ICP4基因实时定量荧光PCR检测的方法,灵敏度高,重复性好,可用于HSV2 ICP4基因的定量分析. |
| 中文关键词:单纯疱疹病毒2型 实时定量荧光PCR 标准曲线 |
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| Quantification of ICP4 Gene of Herpes Simplex Virus Type 2 with Real-time Fluorescent Quantitative Polymerase Chain Reaction. |
| Liu Jifeng Guan Cuiping Tang Xu Xu Tianhong Xu Aie |
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| keywords:ICP4 |
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