| 人干燥综合征A抗原重组体的构建及鉴定 |
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| 引用本文：李倩,高扬,倪安平,于孟学,朱立平,刘音,李永哲,林嘉友,甘晓丹.人干燥综合征A抗原重组体的构建及鉴定[J].医学研究杂志,2008,(2): |
| DOI：
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| 李倩 高扬 倪安平 于孟学 朱立平 刘音 李永哲 林嘉友 甘晓丹 |
| 中国医学科学院/中国协和医科大学北京协和医院检验科，中国医学科学院/中国协和医科大学基础医学研究所免疫研究室，中国医学科学院/中国协和医科大学北京协和医院检验科，中国医学科学院/中国协和医科大学北京协和医院检验科，中国医学科学院/中国协和医科大学基础医学研究所免疫研究室，中国医学科学院/中国协和医科大学基础医学研究所免疫研究室，中国医学科学院/中国协和医科大学北京协和医院检验科，中国医学科学院/中国协和医科大学基础医学研究所免疫研究室，中国医学科学院/中国协和医科大学北京协和医院检验科 |
| 基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 中文摘要:目的 克隆人干燥综合征A抗原基因(SSA-52kD),为SSA抗原的表达和使用重组抗原用于自身抗体的临床检测奠定基础.方法 根据GenBank中检索到的人SSA-52kD cDNA序列,在5'非编码区和3'非编码区设计特异性引物,提取人源Hela细胞总RNA作为模板,反转录RT-PCR扩增人干燥综合征SSA-52kD抗原cDNA.PCR产物纯化后连接至载体PET30a,导人大肠杆菌DH5α,构建重组质粒PET-30a-SSA-52kD.对重组质粒进行酶切鉴定,选择阳性克隆测序;对DNA测序结果进行鉴定分析.结果 RT-PCR扩增产物为1447bp.重组质粒PET-30a-SSA-52kD经Bgl Ⅱ和HindⅢ双酶切证实含目的基因片段.序列分析提示与GenBank中检索到的一致.结论 成功克隆人SSA-52kD基因,并构建重组质粒PET-30a-SSA-52kD. |
| 中文关键词:人干燥综合征A抗原 cDNA克隆 重组体 干燥综合征 抗原 重组体 Sjogren Human Recombinant Identification Construction Antigen 并构 基因片段 序列分析 双酶切 扩增产物 鉴定分析 结果 克隆测序 阳性 选择 酶切鉴定 |
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| Construction and Identification of Recombinant Expressing of Human Sjogren''''s Syndrome Antigen A |
| Li Qian Gao Yang Ni Anping Yu Mengxue Zhu Liping Liu Yin Li Yongzhe Lin Jiayou Gan Xiaodan |
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| keywords:Human Sjogren's syndrome antigen A,cDNA clone,Recombinant |
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