Qβ噬菌体A2基因的克隆与生物活性分析 |
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引用本文:李树,王杰,王彤.Qβ噬菌体A2基因的克隆与生物活性分析[J].医学研究杂志,2008,(6): |
DOI:
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李树 王杰 王彤 |
[1]中国刑警学院法医教研室,沈阳110035 [2]沈阳医学院生化及分子生物学教研室,沈阳110035 |
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中文摘要:目的 通过基因重组技术构建Qβ噬菌体A2基因表达载体,并对其生理学活性进行分析.方法 采用PCR技术从Qβ基因组中扩增A2基因,克隆到pBAD表达载体中构建pBADA2重组质粒;对重组质粒进行酶切鉴定、DNA测序分析;转化宿主细胞JM109,SDS-PAGE检测Arabinose诱导后A2蛋白的表达;光电比浊法测定大肠杆菌生长曲线鉴定pBAD A2在不同宿主细胞中的溶菌性.结果 经菌落PCR筛选、序列测定和酶切鉴定证实表达载体pBAD A2构建成功,并在JM109中获得高表达,其表达水平随Arabinose的浓度增加而增高,Arabinose在0.2%时达到高峰.OD660显示pBAD A2具有溶菌性,可快速溶解大肠杆菌JM109、HB101和594,而对BE110没有溶解活性.结论 构建成功高效表达A2蛋白的重组载体pBADA2,表达的蛋白具有良好的溶菌性,为新型抗菌药物开发奠定了理论和实践基础. |
中文关键词:Qβ噬菌体 A2基因 溶菌性 噬菌体 基因 克隆 生物活性分析 Gene Biological Activity Analyzing Cloning 实践 理论 药物开发 抗菌 重组载体 高效表达 溶解活性 快速溶解 显示 浓度 表达水平 序列测定 |
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Cloning and Analyzing Biological Activity of A2 Gene in Qβ Phage |
Li Shu Wang Jie Wang Tong |
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