评价一种新CYP2C9突变型对药物代谢的影响
投稿时间:2018-08-31  修订日期:2018-10-08  点此下载全文
引用本文:亢奋恒,张博文,戴大鹏,李传宝,蔡剑平.评价一种新CYP2C9突变型对药物代谢的影响[J].医学研究杂志,2019,48(6):54-59
DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2019.06.013
摘要点击次数: 994
全文下载次数: 639
作者单位E-mail
亢奋恒 北京医院北京大学第五临床医学院、国家卫生健康委员会北京老年医学研究所 100730  
张博文 北京医院北京大学第五临床医学院、国家卫生健康委员会北京老年医学研究所 100730  
戴大鹏 北京医院北京大学第五临床医学院、国家卫生健康委员会北京老年医学研究所 100730  
李传宝 北京医院北京大学第五临床医学院、国家卫生健康委员会北京老年医学研究所 100730  
蔡剑平 北京医院北京大学第五临床医学院、国家卫生健康委员会北京老年医学研究所 100730 caijp61@vip.sina.com 
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31371280);卫生部行业科研专项基金资助项目(201302008)
中文摘要:目的 在体外表达细胞色素P2C9(32T>C),构建酶促反应体系,检测其对甲苯磺丁脲(tolbutamide)的代谢活性。方法 利用定向诱变技术,以细胞色素P2C9野生型的互补DNA为反义链,获得细胞色素P2C9*3以及细胞色素P2C9(32T>C)的complementary DNA,利用杆状病毒穿梭载体bacmid抽提试剂盒获得bacmid,转染伪黏虫卵巢细胞,充分表达后提取微粒体蛋白质,并用免疫印迹法检测其表达量。在体外条件下,测定各型细胞色素P2C9催化甲苯磺丁脲代谢的最大反应速率Vm和米氏常数Km,评价新突变体的催化功能。 结果 利用昆虫表达系统表达获得细胞色素P2C9*1、细胞色素P2C9*3和细胞色素P2C9(32T>C)3种微粒体蛋白质。免疫印迹结果显示,新变异型蛋白表达水平接近于野生型。体外代谢实验结果显示,细胞色素P2C9(32T>C) 针对甲苯磺丁脲的体外清除率(Vm/Km)明显低于野生型,体外酶学活性为野生型的12.40%。结论 在体外条件下,细胞色素P2C9(32T>C)对甲苯磺丁脲的代谢活性明显下降,提示携带有该基因型的患者服用细胞色素P2C9的底物药时,体内代谢速率可能会有不同程度的降低,用药前需考虑调整剂量。
中文关键词:细胞色素P2C9 新突变体 体外研究
 
查看全文  查看/发表评论  下载PDF阅读器

京公网安备 11010502037822号