| 中文摘要:目的 探讨外源性一氧化碳释放分子2对脓毒症大鼠T淋巴细胞的影响。方法 采用腹腔注射LPS方法制备脓毒症模型。采用数字表法将 28只雄性 SD 大鼠随机分为阴性对照组(n＝7)、LPS组(n＝7)、外源性一氧化碳释放分子2(CORM-2)(10mg/L LPS+10μmol/L CORM-2干预)、无活性外源性一氧化碳释放分子2(iCORM-2)组(10mg/L LPS+10μmol/L iCORM-2干预)。给予相应试剂预处理24h后处死大鼠,收集血液、脾脏、肠系膜淋巴结等标本,进行模型验证,应用流式细胞仪观察和计数CD4与CD8标记阳性T细胞数,计算CD4/CD8阳性细胞比值(CD4+/CD8+),苏木精-伊红(HE)染色观察脾脏组织病理变化,观察T淋巴细胞含量计数,用Western blot法检测Fas、caspase-9、caspase-3的蛋白表达。结果 观察大鼠小肠光镜下形态,与阴性对照组比较,大鼠脓毒症模型造模成功。流式细胞仪观察,与阴性对照组比较,LPS组24h后CD4+ T细胞百分比显著降低(41.05%±5.26% vs 53.06%±6.28%),CD8+T细胞百分比显著降低(33.98%±7.47% vs 40.33%±7.23%),CD4+/CD8+ 比值显著降低(1.21±0.70 vs 1.31±0.87),差异有统计学意义(P<0.05)。与LPS组比较,LPS+CORM-2组24h后CD4+ T 细胞百分比显著增加(50.02±5.58 vs 41.05±5.26),CD8+T 细胞百分比显著增加(38.12±7.41 vs 33.98±7.47),CD4+/CD8+比值显著增加(1.31±0.75 vs 1.21±0.70),差异有统计学意义(P<0.05)。LPS+iCORM-2 组与LPS组上述各指标比较,差异无统计学意义。取脾脏病理学观察,与阴性对照组比较,LPS组T淋巴细胞含量计数在光镜下观察明显减少,与LPS组比较,LPS+CORM-2组T淋巴细胞含量计数在光镜下观察明显增加。用Western blot法检测Fas、caspase-9、caspase-3的蛋白表达,与阴性对照组比较,LPS组处理24h后,Fas、caspase-9、caspase-3蛋白表达明显上调(P<0.05),在同时间点,与LPS组比较,经过LPS+CORM-2处理24h后,Fas、caspase-9、caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.05),LPS+iCORM-2 组与 LPS 组上述各指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 外源性一氧化碳释放分子2能够在脓毒症模型中通过抑制凋亡蛋白的表达减少T淋巴细胞凋亡。 |
