microRNA-513b-5p通过抑制αB-crystallin 促进晶状体细胞氧化应激和凋亡 |
投稿时间:2018-10-18 修订日期:2018-11-15 点此下载全文 |
引用本文:张爱华.microRNA-513b-5p通过抑制αB-crystallin 促进晶状体细胞氧化应激和凋亡[J].医学研究杂志,2019,48(9):145-150, 163 |
DOI:
10.11969/j.issn.1673-548X.2019.09.033 |
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基金项目:上海市青浦区科学发展基金资助项目(青科发2013-17) |
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中文摘要:目的 研究microRNA(miR)-513b-5p对晶状体稳定性调节蛋白αB-crystallin的调节关系,及miR-513b-5p对晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)氧化应激和凋亡调节的下游机制。方法 实时定量PCR(RT-qPCR)和Western blot法分别检测白内障患者和健康志愿者晶状体组织中miR-513b-5p及αB-crystallin的水平。miR-513b-5p拟似物mimic单独转染LEC细胞SRA01/04,或抑制剂和H2O2共处理SRA01/04;另外,mimic与αB-crystallin过表达质粒cDNA3.1-αB-crystallin(c-CRYAB)联合转染SRA01/04,试剂盒检测的细胞凋亡率,RT-qPCR法和Western blot法分别检测miR-513b-5p的水平及αB-crystallin、活性氧(ROS)和超氧化物歧化酶(SOD)的表达变化,生物信息学分析和荧光素酶报告基因实验研究miR-513b-5p和αB-crystallin的靶向关系。结果 白内障患者晶状体组织中miR-513b-5p的水平显著上调(P<0.05)和αB-crystallin的表达水平下调(P<0.05);过表达miR-513b-5p促进SRA01/04凋亡和活性氧ROS分子水平,下调抗氧化分子SOD;抑制miR-513b-5p降低H2O2所诱导的活性氧ROS(P<0.05);αB-crystallin的表达被miR-513b-5p过表达显著性下调(P<0.05),miR-513b-5p过表达对细胞凋亡和ROS与SOD水平的调控作用被αB-crystallin过表达显著削弱(P<0.05)。结论 miR-513b-5p通过对αB-crystallin蛋白的负调节从而促进LEC的氧化应激和凋亡。 |
中文关键词:microRNA-513b-5p αB-crystallin 晶状体 上皮细胞氧化应激凋亡 |
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