| 中文摘要:目的 研究可溶性高尿酸(uric acid,UA)是否通过NLRP3炎性体途径参与人脐静脉内皮细胞活化。方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),用200μg/ml的UA培养后,用实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞内NLRP3和pro-IL-1β mRNA表达量；检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、E-选择素(E-selectin)、干扰素诱导蛋白10(CXCL10)、C-C原件趋化因子26(CCL26)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS) mRNA水平；用Western blot法测定NLRP3、pro-IL-1β和IL-1β蛋白表达量；用免疫荧光检测NLRP3与ASC共定位和NF-κB核移位情况；并用荧光探针测定胞质活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果 200μg/ml的UA上调黏附分子ICAM-1、E-选择素(P=0.000)和趋化分子CXCL10、CCL26mRNA水平(P<0.05),下调eNOS mRNA水平(P<0.01),并上调细胞内ROS水平,提示HUEVCs处于活化状态。UA对NLRP3、pro-IL-β mRNA和蛋白水平无显著影响；成熟IL-1β也无显著增加。NF-κB没有明显的核移位现象,但NLRP3-ASC复合体显著增加。结论 可溶性高UA诱导HUVECs活化,虽然UA诱导NLRP3-ASC复合体体形成,但对IL-1β的产生没有显著影响。因此,在细胞水平,可溶性高UA主要不是通过激活NLRP3炎性体途径诱导人脐静脉内皮细胞活化。 |
