粉防己碱对人视网膜母细胞瘤细胞株S0-Rb50 增殖凋亡影响的可能机制研究
投稿时间:2019-09-12  修订日期:2019-09-29  点此下载全文
引用本文:马高恩,焦云娟,贺琳,刘向玲.粉防己碱对人视网膜母细胞瘤细胞株S0-Rb50 增殖凋亡影响的可能机制研究[J].医学研究杂志,2020,49(4):117-122,99
DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2020.04.025
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作者单位E-mail
马高恩 新乡医学院第三附属医院眼一科 453003  
焦云娟 新乡医学院第三附属医院眼一科 453003 jiaoyunjuan1122@163.com 
贺琳 新乡医学院第三附属医院眼一科 453003  
刘向玲 新乡医学院第三附属医院眼一科 453003  
基金项目:河南省医学科技攻关计划(201602159)
中文摘要:目的 观察粉防己碱(tetrandrine,Tet)通过磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路对人视网膜母细胞瘤细胞株S0-Rb50增殖及凋亡的影响。方法 对数期生长S0-Rb50细胞分为4组,即对照组、Tet低、中、高剂量组,分别用0、2.5、5.0、10.0μmol/L Tet处理,观察干预24h细胞形态学变化;MTT法检测干预24、48、72h时各组吸光度(A)值;流式细胞术检测干预24h各组细胞周期及细胞凋亡率;实时荧光定量PCR及Western blot法检测干预24h各组细胞PI3K、Akt、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA和蛋白表达量及裂解的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)蛋白表达量。结果 倒置相差显微镜观察发现,对照组细胞形态规则、融合成片,不同干预组细胞随Tet浓度升高细胞体积逐渐减小、核质比例减小,不能融合成片,视野内漂浮细胞或细胞崩解碎片增多。与对照组比较,Tet高剂量组干预24h时A值较低,差异有统计学意义(P<0.05),Tet各剂量组干预48、72h时A值均较低,且随干预剂量升高呈降低趋势,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组MTT试验A值随干预时间的延长呈升高趋势(P<0.05),Tet高剂量组MTT试验A值随干预时间的延长无明显变化(P>0.05)。与对照组比较,Tet各剂量组G0/G1、S期细胞占比、PI3K、Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量及pAkt/Akt较低,且随干预剂量升高呈降低趋势,差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,Tet各剂量组G2/M期细胞占比、凋亡率、Bax mRNA和蛋白相对表达量及cleaved caspase-3蛋白相对表达量较高,且随干预剂量升高呈降低趋势,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Tet可抑制人视网膜母细胞瘤细胞株S0-Rb50增殖、促进凋亡,可能与抑制PI3K/Akt信号通路、下调Bcl-2 mRNA和蛋白、上调Bax mRNA和蛋白及cleaved caspase-3蛋白表达相关。
中文关键词:人视网膜母细胞瘤 粉防己碱 增殖 凋亡
 
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