PSMB8在人绒毛膜滋养层细胞中对细胞凋亡和自噬的影响
投稿时间:2019-10-14  修订日期:2020-01-07  点此下载全文
引用本文:栾晓瑾,颜一丹,陈霞,王敏,陈万银,郑倩雯,谢冰,于骏,方杰.PSMB8在人绒毛膜滋养层细胞中对细胞凋亡和自噬的影响[J].医学研究杂志,2020,49(6):113-118,78
DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2020.06.025
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栾晓瑾 江苏大学附属医院妇科镇江 212001  
颜一丹 江苏大学附属医院妇科镇江 212001  
陈霞 江苏大学附属医院妇科镇江 212001  
王敏 江苏大学附属医院妇科镇江 212001  
陈万银 江苏大学附属医院妇科镇江 212001  
郑倩雯 江苏大学附属医院妇科镇江 212001  
谢冰 江苏大学附属医院妇科镇江 212001  
于骏 江苏大学附属医院妇科镇江 212001  
方杰 江苏大学附属医院妇科镇江 212001 fangjie070@163.com 
基金项目:江苏省镇江市社会发展项目(SH2018065,SH2017013);江苏大学“青年英才培育计划”项目
中文摘要:目的 初步探讨蛋白酶体亚基PSMB8(proteasome subunit beta 8)对人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/Svneo)凋亡及自噬的影响。方法 将HTR-8细胞分为转染组和对照组,采用瞬时转染的方法分别将PSMB8 siRNA-1、PSMB8 siRNA-2转入转染组中,将NC siRNA转入对照组中。转染48h后用qRT-PCR进行干涉效率验证,CCK-8检测细胞增殖情况,TUNEL和流式细胞术分析细胞凋亡情况,免疫荧光染色检测细胞内caspase-3(cleaved)和LC3蛋白的表达,qRT-PCR检测细胞中自噬相关基因mRNA表达水平。结果 qRT-PCR结果显示,PSMB8 siRNA-1组干扰效果较好。与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组细胞增殖能力减弱,HTR-8细胞中TUNEL(15.05±2.62 vs 33.40±2.44, P=0.000)和caspase-3(cleaved)(21.70±5.87 vs 53.29±10.29, P<0.01)阳性率增加。流式结果显示,与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组存活细胞比例减少(89.10±0.78 vs 77.00±1.68, P=0.000),早期凋亡和晚期凋亡细胞比例增加(9.09±0.65 vs 10.71±0.61, P<0.05),坏死细胞比例也增加(2.49±0.73 vs 12.49±2.02,P<0.01)。与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组LC3蛋白阳性细胞率增加(19.02±3.78 vs 31.90±4.87, P<0.05),各自噬相关基因mRNA相对表达水平均上调。结论 在HTR-8细胞中沉默PSMB8基因表达可以诱导细胞凋亡并且激活自噬。
中文关键词:稽留流产 绒毛膜滋养层细胞 蛋白酶体亚基PSMB8 凋亡 自噬
 
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