中文摘要:目的 研究人尿源干细胞(human urine-derived stem cells,hUSC)在不同成肌诱导液中的体外成肌分化能力及效果。方法 提取正常成人志愿者新鲜尿液,经体外培养、扩增、流式细胞术鉴定后,用4种不同配方的成肌诱导液分别诱导 hUSC 向骨骼肌细胞分化。在诱导第28天,光镜下观察细胞形态。并用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测成肌分化特异基因结蛋白(desmin)和肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC)的表达量。结果 hUSC的细胞表面标物CD29、CD44、CD73和CD90 为阳性,CD34、CD45为阴性,提示其为间充质来源。hUSC 在A、B、C、D 成肌诱导液中诱导培养 28天后,细胞伸展变长,呈现肌细胞形态,可见肌管样细胞。4种成肌诱导液诱导14天及28天后成肌分化特异基因desmin和MyHC表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。组间比较提示,B和C成肌诱导液成肌分化下desmin和MyHC相对表达水平高于A、D成肌诱导液组。结论 4种成肌诱导液均可将hUSC 定向分化成骨骼肌细胞。从细胞分化形态和成肌特异基因表达水平上分析,C成肌诱导液成肌分化效果更好。hUSC的这种向骨骼肌分化的能力,提示其在疾病治疗和病因学研究上具有潜在价值。 |