| 中文摘要:目的 探究动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)斑块中平滑肌细胞C型凝集素识别受体2(Dectin-2)对细胞增殖和表型转化的影响。方法 高脂饲喂ApoE-/-小鼠6个月构建动脉粥样硬化模型,取小鼠动脉,荧光定量PCR(real-time qPCR,RT-PCR)检测Dectin-2 mRNA相对表达量；平滑肌细胞敲降Dectin-2,细胞增殖实验检测平滑肌细胞增殖率；RT-PCR检测平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin, α-SMA)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)mRNA相对表达量；蛋白免疫印迹(Western blot)法检测磷酸化信号转导及转录激活蛋白3(p-signal transducer and activator of transcription, p-STAT3)、信号转导及转录激活蛋白3(STAT3)、p-JAK 激酶(p-Janus kinase, p-JAK)、JAK激酶(JAK)表达水平。结果 敲降组AS斑块中Dectin-2 mRNA相对表达量明显高于对照组(P=0.000),组织免疫荧光得到进一步验证；下调平滑肌细胞Dectin-2可显著抑制细胞增殖(P＜0.01),下调平滑肌细胞Dectin-2可显著抑制OPN、PCNA mRNA表达(P＜0.01),促进α-SMA mRNA表达(P＜0.01),下调平滑肌细胞Dectin-2可显著抑制p-STAT3、p-JAK水平(P＜0.01),而总STAT3、JAK水平无明显变化。结论 AS斑块中Dectin-2表达明显升高,平滑肌细胞中敲降Dectin-2明显抑制细胞增殖和表型转化过程。分子机制研究发现,Dectin-2调节JAK-STAT3信号磷酸化激活。 |
