HO-1基因转染对骨髓间充质干细胞增殖、 表型及多向分化能力的影响
投稿时间:2021-02-02  修订日期:2021-02-21  点此下载全文
引用本文:陈旭昕,唐俭,李虎明,孟激光,韩志海.HO-1基因转染对骨髓间充质干细胞增殖、 表型及多向分化能力的影响[J].医学研究杂志,2021,50(8):27-31
DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2021.08.008
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陈旭昕 中国人民解放军总医院第六医学中心呼吸与危重症医学科北京 100048  
唐俭 中国人民解放军总医院第六医学中心呼吸与危重症医学科北京 100048  
李虎明 中国人民解放军总医院第六医学中心呼吸与危重症医学科北京 100048  
孟激光 中国人民解放军总医院第六医学中心呼吸与危重症医学科北京 100048  
韩志海 中国人民解放军总医院第六医学中心呼吸与危重症医学科北京 100048 zhihaihandoctor@163.com 
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81300050);北京市自然科学基金资助项目(7182163);中国人民解放军总医院第六医学中心创新培育基金资助项目(CXPY201902)
中文摘要:目的 探讨在体外培养条件下,慢病毒载体介导的血红素加氧酶-1(HO-1)基因转染对骨髓间充质干细胞(MSC)增殖、表型及多向分化能力的影响。方法 分离培养大鼠源性骨髓MSC,利用过表达HO-1重组慢病毒载体(lenti-HO-1)将HO-1基因转染到MSC中,用荧光倒置显微镜及Western blot法分析评估转染效率。利用1.5μg/ml的嘌呤霉素筛选稳定过表达HO-1的MSC(MSC-HO-1)。用Western blot法检测MSC与MSC-HO-1内HO-1蛋白表达情况,用细胞计数法绘制MSC与MSC-HO-1的生长曲线,流式细胞仪检测MSC与MSC-HO-1表型,成骨、成脂及成软骨细胞诱导分化检测多向分化潜能变化。结果 MOI=50的 Lenti-HO-1可高效转染MSC。与MSC比较,MSC-HO-1在经过多次传代后仍能高效过表达HO-1,差异有统计学意义(P<0.05)。MSC-HO-1的增殖生长趋势、表面标志表达及多向分化潜能均与未转染的MSC相似。结论 重组慢病毒载体Lenti-HO-1可成功转染MSC并高效表达转入的基因;HO-1基因修饰对MSC增殖活性、免疫表型及多向分化潜能无显著影响。
中文关键词:血红素加氧酶-1 慢病毒 间充质干细胞 表型 多向分化
 
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