| 泛素连接酶Cul7调控人滋养层细胞 Notch1蛋白稳定性 |
| 投稿时间：2021-03-18 修订日期：2021-03-29 点此下载全文 |
| 引用本文：焦寒,徐阳,范冰凌,林欣欣,付杰军.泛素连接酶Cul7调控人滋养层细胞 Notch1蛋白稳定性[J].医学研究杂志,2021,50(8):41-46 |
| DOI：
10.11969/j.issn.1673-548X.2021.08.011 |
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| 基金项目:国家自然科学基金资助项目(82060532,81560483)；广西壮族自治区自然科学基金资助项目(2018GXNSFAA281177) |
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| 中文摘要:目的 探讨泛素连接酶Cullin 7(Cul7)在人胎盘绒毛外滋养层细胞HTR8/SVneo中对Notch1蛋白稳定性的影响,初步阐明Cul7对Notch1蛋白表达的调控作用。方法 Western blot法检测Cul7基因敲除的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)中Notch1蛋白表达的变化。慢病毒稳定转染构建Cul7低表达HTR8/SVneo细胞系,通过real-time PCR检测Notch1 mRNA的表达。Western blot法检测干扰或过表达Cul7后Notch1蛋白的表达。应用蛋白免疫共沉淀(Co-IP)确定Cul7与Notch1蛋白结合情况。结果 与野生型MEF细胞比较,Cul7基因敲除MEF细胞Notch1蛋白表达增加。在HTR8/SVneo细胞也观察到干扰Cul7后Notch1蛋白表达显著升高,但对Notch1 mRNA的表达无显著影响。用放线菌酮(CHX)处理细胞后,与对照组比较干扰Cul7使Notch1蛋白降解的半衰期延长。将Flag-Notch1重组质粒和HA-Cul7真核表达质粒导入HTR8/SVneo细胞后,Co-IP结果显示外源性Cul7与Notch1无结合。结论 Cul7调控Notch1降解速度,但对Notch1转录表达无显著影响。Cul7可能通过间接方式调控Notch1蛋白稳定性。 |
| 中文关键词:Notch1 Cullin 7 泛素化 胎盘发育 |
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