| 柯萨奇B组3型病毒SYBR Green Ⅰ RT-PCR 检测方法的建立 |
| 投稿时间：2021-07-07 修订日期：2021-07-09 点此下载全文 |
| 引用本文：张伟,李咏洁,杨凤梅,李艳艳,靳玮华,徐鸿界,李明学,刘权,赵远,和占龙.柯萨奇B组3型病毒SYBR Green Ⅰ RT-PCR 检测方法的建立[J].医学研究杂志,2022,51(1):55-59 |
| DOI：
10.11969/j.issn.1673-548X.2022.01.014 |
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| 基金项目:中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目(2016-I2M-2-001);云南省重大科技专项(2017ZF020);昆明市科技创新和服务能力提升计划重点项目(2016-2R-07674) |
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| 中文摘要:目的 建立一种灵敏、特异的柯萨奇B组3型(CV-B3)病原SYBR Green Ⅰ RT-PCR实时荧光定量检测方法,用于快速、准确地检测CV-B3。方法 设计柯萨奇B组病毒通用引物以及VP1基因的T7启动子特异性引物,以体外转录获得的RNA为标准品,绘制标准曲线,建立CV-B3的荧光定量PCR检测方法;对检测方法的敏感度、特异性、重复性进行评价。结果该检测方法在10～109 拷贝/微升范围内具有良好的扩增效率和线性关系,最低检测限为10拷贝/微升,标准曲线r2=0.999, 扩增效率为95.7%；且对柯萨奇病毒A组6型(CV-A6)、柯萨奇病毒A组10型(CV-A10)、肠道病毒71型(EV-71)均无交叉反应,重复性实验变异系数(CV%)<2%。结论 本实验建立的检测方法敏感度较高,同时具备良好的特异性及重复性,可用于CV-B3病原的临床及实验室样本的定性定量检测。 |
| 中文关键词:柯萨奇病毒B组3型 SYBR Green Ⅰ RT-PCR |
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