miR-181b-5p负调控CYLD的表达促进膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭
投稿时间:2022-01-20  修订日期:2022-03-11  点此下载全文
引用本文:朱奕,李世豪,刘宏伟.miR-181b-5p负调控CYLD的表达促进膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭[J].医学研究杂志,2022,51(11):82-88
DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2022.11.018
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作者单位
朱奕 广东医科大学附属医院泌尿外科湛江 524001 
李世豪 广东医科大学附属医院泌尿外科湛江 524001 
刘宏伟 广东医科大学附属医院泌尿外科湛江 524001 
基金项目:广东省自然科学基金资助项目(2019A1515011454);广东医科大学科研基金资助项目(GDMUZ2019004)
中文摘要:目的 探讨miR-181b-5p通过下调CYLD的表达促进膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-181b-5p在膀胱癌细胞系(T24、UM-UC-3、5637)和人膀胱上皮永生化细胞(SV-HUC-1)中的表达水平。在T24和UM-UC-3细胞中转染miR-181b-5p模拟物 (miR-181b-5p组)和miR-NC(对照组),CCK-8实验和克隆形成实验检测过表达miR-181b-5p对T24和UM-UC-3细胞增殖的影响,Transwell实验检测过表达miR-181b-5p对T24和UM-UC-3细胞迁移和侵袭的影响。采用生物信息学预测miR-181b-5p潜在下游靶基因CYLD,双荧光素酶报告基因实验验证miR-181b-5p是否与CYLD的3′-UTR结合,qRT-PCR检测过表达miR-181b-5p对CYLD mRNA的影响,Western blot法检测过表达miR-181b-5p对CYLD蛋白的影响。在T24和UM-UC-3细胞中沉默CYLD的表达,采用CCK8实验、克隆形成实验和Transwell实验检测沉默CYLD对T24和UM-UC-3细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果 与SV-HUC-1比较,膀胱癌细胞系中miR-181b-5p的表达水平升高(P<0.05)。与对照比较,过表达miR-181b-5p和沉默CYLD均促进膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,过表达miR-181b-5p 明显降低野生型CYLD 的荧光素酶活性(P<0.05)。qRT-PCR和Western blot法结果显示过表达miR-181b-5p显著下调CYLD mRNA和蛋白的水平(P<0.05)。结论 miR-181b-5p通过负调控CYLD的表达促进膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭。
中文关键词:膀胱癌 miR-181b-5p CYLD 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
 
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