| 中文摘要:目的 探讨肉苁蓉提取物松果菊苷(echinacoside, ECH)对db/db糖尿病心肌病小鼠心肌细胞的保护作用及其作用机制。方法 选取29只SPF级6周龄雄性db/db小鼠和db/m小鼠适应性饲养1周后,按照随机数字表法取9只db/m小鼠作为正常对照组(db/m组,n=9),将db/db小鼠分为糖尿病心肌病组(db/db组,n=10)与ECH干预组(db/db+ECH组,n=10)。其中db/db组和db/m组小鼠每日按照0.05ml/10g标准行0.9%氯化钠溶液灌胃10周。db/db+ECH组小鼠按ECH 300mg/(kg·d)灌胃10周。每周监测3组的小鼠体质量,观察小鼠摄食、饮水及活动情况。于鼠龄第18周用2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠并处死,取尾静脉血测定空腹血糖和血脂。采用苏木精-伊红(hematoxylin eosin, HE)染色观察心肌组织病理改变,采用TUNEL染色法测定心肌细胞凋亡率,采用Western blot法检测凋亡相关蛋白p53、p38MAPK、caspase-3和caspase-8的表达水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)测定心肌细胞p53m RNA、p38MAPK mRNA和caspase mRNA、Bcl-2mRNA、Bax mRNA的表达水平。结果 与db/m组比较,db/db组小鼠的体质量、血糖和血脂水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。HE染色结果显示,与db/m组比较,db/db组小鼠的心肌细胞可见明显肥大、坏死,心肌细胞排列结构紊乱；而db/db+ECH组小鼠的心肌细胞形态有所缓解,细胞间隙减少,排列较规则。TUNEL染色结果显示,与db/m组比较,db/db组小鼠的心肌细胞凋亡程度显著增高(P<0.01),同时伴有p53蛋白、p38MAPK蛋白、caspase-3和caspase-8蛋白表达量显著升高(P<0.01),且p53mRNA、p38MAPK mRNA和caspase mRNA、Bax mRNA表达量明显上升,Bcl-2mRNA水平下调(P<0.01)。与db/db组比较,db/db+ECH组小鼠上述指标均有明显降低,且TUNEL染色观察小鼠心肌细胞凋亡指数显著下降(P<0.01)。结论 ECH能够明显改善db/db小鼠心肌细胞凋亡,其机制可能与通过p53/p38MAPK/caspase信号通路有关。 |
