| MAO-A通过激活ROS/JNK通路加重心肌细胞脂质沉积 |
| 投稿时间：2022-10-07 修订日期：2022-10-24 点此下载全文 |
| 引用本文：代地林,吴园,包明威.MAO-A通过激活ROS/JNK通路加重心肌细胞脂质沉积[J].医学研究杂志,2023,52(9):23-28, 34 |
| DOI：
10.11969/j.issn.1673-548X.2023.09.006 |
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| 基金项目:国家自然科学基金资助项目(81770507,81970438) |
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| 中文摘要:目的 观察单胺氧化酶A(monoamine oxidase A,MAO-A)对与3T3-L1脂肪细胞共培养的原代新生大鼠心肌细胞(neonatal rat cardiomyocyte,NRCM)脂质沉积的影响及机制。方法 选取40只出生1~3天的SD大鼠心肌细胞与3T3-L1脂肪细胞构建NRCM/3T3-L1共培养体系,并加入棕榈酸(palmitic acid,PA),模拟肥胖时心肌细胞所处的内环境。将细胞分为对照组、PA组、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)组、过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)组、NE+CLG组、氯吉兰(clorgyline,CLG)组。采用α横纹肌肌动蛋白评估心肌细胞的纯度和面积,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)测定心肌细胞内心房利钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)的mRNA水平,免疫荧光染色测定心肌细胞内活性氧簇水平(reactive oxygen species,ROS),油红O染色评估心肌细胞内脂质沉积,Western blot法测定心肌细胞内MAO-A、JNK的蛋白及磷酸化水平。结果 与对照组比较,PA组心肌细胞面积(14.681±0.481μm2 vs 19.932±0.220μm2, P<0.01)增大,ANP的相对mRNA水平(1.006±0.017 vs 1.914±0.152, P<0.01)、MAO-A的相对蛋白水平(0.117±0.022 vs 0.430±0.092, P<0.01)、ROS水平(0.001±0.001 vs 0.004±0.002,P<0.01)、脂滴面积比(0.001±0.001 vs 0.054±0.002,P<0.01)及p-JNK的相对蛋白水平 (0.032±0.007 vs 0.263±0.119, P<0.05)均增加。与PA组比较,NE明显增加心肌细胞内MAO-A的相对蛋白水平(0.430±0.092 vs 1.114±0.091, P<0.01)和ROS水平(0.004±0.002 vs 0.013±0.001, P<0.01)。另外,NE和H2O2均能增加心肌细胞脂滴面积比(0.054±0.002 vs 0.106±0.005, P<0.05；0.054±0.002 vs 0.092±0.002, P<0.01)和p-JNK的相对蛋白水平(0.263±0.119 vs 0.969±0.082, P<0.05；0.263±0.119 vs 0.640±0.101, P<0.05)。CLG可明显改善NE诱导的异常。结论 MAO-A相对蛋白水平增加会加重与3T3-L1脂肪细胞共培养的心肌细胞内的氧化应激和脂质沉积,其机制可能与ROS/JNK信号级联反应激活有关。 |
| 中文关键词:肥胖 MAO-A 氧化应激 脂质沉积 JNK信号通路 |
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