| 中文摘要:目的 评价时钟基因REV-ERB激动剂SR9009在2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用及其调控铁死亡的潜在机制。方法 SPF级健康雄性SD大鼠24只,体质量为90~110g,采用随机数字表法分为糖尿病假手术组(DS组,n=6)、糖尿病心肌缺血再灌注组(DIR组,n=6)、糖尿病心肌缺血再灌注+REV-ERB激动剂组(DIR+SR9009组,n=6)、糖尿病心肌缺血再灌注+铁死亡激活剂+REV-ERB激动剂组(DIR+Erastin+SR9009组,n=6)。采用腹腔注射1%链脲佐菌素-枸橼酸盐缓冲液40mg/kg的方法制备大鼠2型糖尿病模型。DIR+SR9009组于缺血前6h腹腔注射REV-ERB激动剂SR9009 100mg/kg,DIR+Erastin+SR9009组分别于缺血前24h和12h腹腔注射铁死亡激活剂Erastin 15mg/kg,缺血前6h腹腔注射REV-ERB激动剂SR9009 100mg/kg。2型糖尿病建模成功继续高脂饲料喂养5周后,采用结扎左冠状动脉前降支30min后恢复血流灌注的方法制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。于再灌注2h时颈动脉采血后处死大鼠,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunoadsordent assay,ELISA)检测血清心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)浓度和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,比色法测定心肌Fe2+、线粒体丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,TTC法检测心肌梗死面积,苏木精-伊红染色法观察病理结果,Western blot法检测心肌REV-ERBα、胱氯酸/谷氨酸逆向转运蛋白溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)的表达水平。结果 与DS组比较,DIR组血清cTnI浓度、心肌Fe2+、MDA含量升高,SOD活性降低,REV-ERBα表达升高,SLC7A11和GPX4表达下调(P<0.05)；与DIR组比较,DIR+SR9009组血清cTnI浓度、心肌Fe2+、MDA含量降低,SOD活性升高,REV-ERBα表达下调,SLC7A11和GPX4表达升高,心肌梗死面积减少(P<0.05)；与DIR+SR9009组比较,DIR+Erastin+SR9009组血清cTnI浓度、心肌Fe2+、MDA含量升高,REV-ERBα表达升高,SLC7A11和GPX4表达下调,心肌梗死面积增加(P<0.05)。结论 时钟基因REV-ERB激动剂SR9009预处理可减轻2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤,且与SLC7A11/GPX4轴抗氧化系统异常诱导的铁死亡密切相关。 |
