| 中文摘要:目的 探讨lncRNA LINC00152对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的HMC3小胶质细胞炎性反应的作用机制。方法 将体外培养的HMC3随机分成4组,即空白组(以完全培养基培养)、LPS组(在空白组基础上加入1μg/ml LPS干预)、阴性对照组[即LPS+反义寡聚核苷酸(ASO)-NC组,在LSP干预基础上转染ASO]和LPS+ASO-LINC00152组(在LSP干预基础上转染ASO-LINC00152)。流式检测CD86+(M1型)、CD206+(M2型)细胞比例,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平,以及细胞中iNOS活性,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测PI3K、Akt、p65基因表达水平,Western blot法检测PI3K、Akt、p-Akt、p65、p-p65蛋白表达。结果 与空白组比较,LPS组、LPS+ASO-NC组和LPS+ASO-LINC00152组CD86+比例、TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS表达升高(P＜0.05),p-Akt、p-p65表达增加(P＜0.05),而LPS组和LPS+ASO-NC组CD206+比例下降(P＜0.05)。与LPS组比较,LPS+ASO-NC组CD86+比例升高(P＜0.05),iNOS活性增强(P＜0.05),而LPS+ASO-LINC00152组CD86+比例下降(P＜0.05),CD206+比例升高(P＜0.05),IL-6水平下降(P＜0.05),iNOS活性减弱(P＜0.05),p-Akt、p-p65表达减少(P＜0.05)。与LPS+ASO-NC组比较,LPS+ASO-LINC00152组CD86+比例下降(P＜0.05),CD206+比例升高(P＜0.05),iNOS活性减弱(P＜0.05),p-Akt、p-p65表达减少(P＜0.05)；各组间PI3K、Akt、p65基因及蛋白水平比较差异均无统计学意义(P＞0.05)。结论 ASO-lncRNA LINC00152可通过调控PI3K/Akt/NF-κB信号通路,使LPS诱导的小胶质细胞表型发生改变,减少炎性细胞因子释放,从而发挥抑制炎性反应的作用。 |
