| miR-21a-5p 靶向MATN2抑制LPS诱导的巨噬细胞损伤的实验研究 |
| 投稿时间：2020-11-20 修订日期：2020-12-01 点此下载全文 |
| 引用本文：王立刚,王颖,王涵.miR-21a-5p 靶向MATN2抑制LPS诱导的巨噬细胞损伤的实验研究[J].医学研究杂志,2021,50(5):55-60,66 |
| DOI：
10.11969/j.issn.1673-548X.2021.05.014 |
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| 基金项目:浙江省医药卫生科技计划项目(2021KY494) |
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| 中文摘要:目的 miR-21a-5p对脂多糖(LPS)处理的RAW264.7巨噬细胞的调控作用及分子机制研究。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同浓度LPS处理的巨噬细胞中miR-21a-5p水平；应用miR-21a-5p模拟物(mimics)和阴性对照(miRNA-NC)分别转染LPS处理的巨噬细胞,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡比例；ELISA检测炎性细胞因子水平；TargetScan数据库分析miR-21a-5p的潜在靶基因,蛋白免疫印迹技术(Western blot法)检测MATN2蛋白表达水平；双荧光素酶实验验证miR-21a-5p和MATN2之间的关系。结果 随着LPS处理浓度的增加,miR-21a-5p水平逐渐降低。miR-21a-5p mimics转染RAW264.7巨噬细胞后miR-21a-5p水平显著升高。上调LPS处理的巨噬细胞miR-21a-5p水平后,细胞活力显著升高,细胞凋亡比例降低；促炎性细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β水平降低。qRT-PCR和Western blot法结果表明,上调miR-21a-5p水平后,MATN2蛋白表达和mRNA水平明显降低,而下调miR-21a-5p水平后,MATN2蛋白表达和mRNA明显升高。双荧光素酶报告实验显示miR-21a-5p靶向MATN2的mRNA的3′ 非编码区(3′ UTR)。结论 miR-21a-5p 可以靶向MATN2抑制LPS诱导的巨噬细胞损伤。 |
| 中文关键词:巨噬细胞 miR-21a-5p MATN2 损伤 |
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