炎性微环境下TGF-β1通过TGF-β1/Smad3 通路促进BMSCs成骨分化
投稿时间:2023-02-19  修订日期:2023-03-13  点此下载全文
引用本文:刘翠翠,吴亚星,张淑婷,李向鑫,张静.炎性微环境下TGF-β1通过TGF-β1/Smad3 通路促进BMSCs成骨分化[J].医学研究杂志,2024,53(3):78-83
DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2024.03.016
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作者单位
刘翠翠 徐州医科大学徐州临床学院 221000
徐州市中心医院口腔科 221000 
吴亚星 徐州市中心医院口腔科 221000 
张淑婷 徐州市中心医院口腔科 221000 
李向鑫 徐州医科大学徐州临床学院 221000
徐州市中心医院口腔科 221000 
张静 徐州医科大学徐州临床学院 221000
徐州市中心医院口腔科 221000 
基金项目:国家自然科学基金青年科学基金资助项目(31700814);江苏省徐州市科技计划项目(KC18032)
中文摘要:目的 研究炎性微环境下转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响及作用机制。方法 应用肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α,TNF-α)体外模拟炎性微环境,检测不同浓度TGF-β1对BMSC增殖活性的影响。实验分为对照组[BMSC+成骨诱导液(osteogenic medium,OM)]、实验组(BMSC+TGF-β1+OM)和抑制组[BMSC+SB431542 (TGF-β1拮抗剂)+OM]。应用ALP染色、茜素红染色、实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)及Western blot法对BMSCs成骨分化能力和TGF-β信号通路因子Smad2、Smad3进行检测并比较3组间的差异。结果 低浓度TGF-β1作用下BMSCs增殖活性较高,高浓度(50ng/ml)抑制BMSCs增殖活性;成骨诱导7天和10天时,实验组与其他两组比较,ALP染色较深、面积最大;茜素红染色结果显示,实验组体外矿化结节形成均高于其他两组;RT-qPCR检测结果显示,实验组成骨分化基因OPN、RUNX2与ALP表达均增高,TGF-β信号通路中Smad3在实验组表达最高,抑制组表达最低,差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot法检测结果显示,实验组内OPN、RUNX2与ALP蛋白表达水平增高,差异有统计学意义(P<0.05);TGF-β信号通路中Smad3蛋白表达在3组中差异不明显,而p-Smad3在实验组中表达明显增高、抑制组中明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 炎性微环境中TGF-β1通过激活TGF-β/Smad3信号通路促进了BMSCs成骨分化。
中文关键词:TGF-β1 BMSCs 炎症 信号通路 骨向分化
 
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