| 中文摘要:目的 研究沉默泛素结合酶E2C(ubiquitin-conjugating enzyme 2C,UBE2C)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖能力的影响,并初步研究其作用机制。方法 利用小干扰RNA(si-RNA)沉默MCF-7细胞中UBE2C基因。利用CCK-8实验及克隆形成实验检测细胞增殖能力。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)、Western blot法分别在mRNA、蛋白水平检测细胞周期相关蛋白激酶抑制蛋白p21以及细胞周期促进蛋白细胞周期蛋白D1(cell cycle protein D1,CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)、细胞周期蛋白依赖性激酶6(cyclin-dependent kinase 6,CDK6)的表达。结果 与空白对照组及阴性对照(si-NC)组细胞比较,si-UBE2C组细胞UBE2C表达下调。CCK-8实验以及克隆形成实验结果显示,si-UBE2C组细胞增殖能力明显降低；与空白对照组及si-NC组细胞比较,si-UBE2C组细胞周期相关蛋白激酶抑制蛋白p21在mRNA及蛋白水平的表达均上调,而细胞周期促进蛋白CyclinD1、CDK4、CDK6在mRNA及蛋白水平的表达均下调。结论 UBE2C可以通过介导CyclinD1/CDK4/CDK6复合物及p21的表达来调控MCF-7细胞的增殖能力,促进乳腺癌的进展。 |
