| 柯萨奇病毒B组5型TaqMan一步法 RT-qPCR检测方法的建立 |
| 投稿时间：2023-07-04 修订日期：2023-10-31 点此下载全文 |
| 引用本文：刘煜菡,张名 郭伟,许丹菡,冯昌增,徐丽兰,马绍辉.柯萨奇病毒B组5型TaqMan一步法 RT-qPCR检测方法的建立[J].医学研究杂志,2024,53(7):84-88 |
| DOI：
10.11969/j.issn.1673-548X.2024.07.017 |
| 摘要点击次数: 805 |
| 全文下载次数: 1303 |
|
| 基金项目:云南省科技计划项目(202202AA100016) |
|
| 中文摘要:目的 建立柯萨奇病毒B组5型(coxsackievirus B5,CV-B5)特异的TaqMan一步法实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测方法。方法 根据CV-B5的VP1序列,设计特异性引物和TaqMan探针。将目的基因插入pMD18TM载体,在DH5α感受态细胞中扩增,大肠杆菌体外转录后获得RNA标准品并建立标准曲线,最后对检测方法的重复性、敏感度和特异性进行评价。结果 该方法在103~1011拷贝/微升的模板范围内具有良好的线性关系(r2>0.99),扩增效率E=100.9%,敏感度达1×103拷贝/微升,只对CV-B5有特异性扩增曲线,且重复性较好。结论本实验建立的TaqMan一步法RT-qPCR检测方法有较高的敏感度、特异性和重复性,有良好的抗干扰性,可用于CV-B5的临床样本检测和绝对定量分析。 |
| 中文关键词:柯萨奇病毒B组5型 实时荧光定量聚合酶链反应 TaqMan探针法 |
| |
|
|
| 查看全文 查看/发表评论 下载PDF阅读器 |
|
|
|
