矾冰纳米乳促巨噬细胞M2型极化及抑制炎性细胞因子的表达 |
投稿时间:2023-10-11 修订日期:2023-10-26 点此下载全文 |
引用本文:刘清,苏靖群,曹海琳,丁笑,王娟,范洪桥,陆文洪,刘丽芳.矾冰纳米乳促巨噬细胞M2型极化及抑制炎性细胞因子的表达[J].医学研究杂志,2024,53(7):100-104 |
DOI:
10.11969/j.issn.1673-548X.2024.07.020 |
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基金项目:湖南省自然科学基金青年科学基金资助项目(2022JJ40331);湖南省中医药管理局“十四五”第一批中医药领军人才培养项目{湘中医药[2021]10号};湖南省卫生健康委员会卫生科研课题一般资助项目(B202304136861) |
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中文摘要:目的 观察矾冰纳米乳对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠单核-吞噬细胞(RAW264.7)分泌炎性细胞因子的影响。方法 采用LPS诱导RAW264.7为M1表型,显微镜下观察细胞形态的变化,噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)比色法检测不同浓度矾冰纳米乳对RAW264.7细胞活力的影响,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的mRNA相对表达量,应用流式细胞仪测定M1/M2型极化的表面标志物CD68和CD206阳性表达率,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清液中IL-6、TNF-α和IL-10含量。结果 采用LPS和矾冰纳米乳对RAW264.7体外培养进行干预时,细胞形态发生了明显变化;低、中、高浓度(8.15、16.30、32.60mg/ml)矾冰纳米乳对RAW264.7无毒性作用;与不加任何处理的空白组比较,LPS刺激生长良好的RAW264.7细胞24h后,模型组中CD68高表达(P<0.001)、CD206低表达(P>0.05),证明M1型巨噬细胞造模成功。药物干预后,与模型组比较,CD68膜表面分子表达量较前降低(P<0.001),CD206较前升高(P<0.001),证明矾冰纳米乳可以增加M2型巨噬细胞膜蛋白的表达量;与模型组(LPS组)比较,矾冰纳米乳可以抑制LPS诱导的巨噬细胞炎症模型中TNF-α、IL-6分泌(P<0.01,P<0.05),而促进IL-10分泌(P<0.0001);与模型组(LPS组)比较,RT-qPCR检测结果显示,矾冰纳米乳对TNF-α、IL-6mRNA表达有显著抑制作用(P<0.01,P<0.05),而促进IL-10mRNA表达(P<0.01)。结论 矾冰纳米乳对LPS诱导的RAW264.7细胞炎性反应有较好的抗炎活性,其机制可能是通过抑制炎性细胞因子的分泌及表达而实现的。 |
中文关键词:矾冰纳米乳 LPS RAW264.7 巨噬细胞极化 抗炎作用 炎性细胞因子 |
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