死亡结构域相关蛋白的核-质定位对乳腺癌MCF-7细胞功能的影响 |
投稿时间:2023-04-16 修订日期:2023-04-26 点此下载全文 |
引用本文:王佳,马旭辉,高世磊,张新峰,刘怀民.死亡结构域相关蛋白的核-质定位对乳腺癌MCF-7细胞功能的影响[J].医学研究杂志,2024,53(8):79-84 |
DOI:
10.11969/j.issn.1673-548X.2024.08.016 |
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基金项目:国家自然科学基金青年科学基金资助项目(82205217);河南省自然科学基金青年科学基金资助项目(222300420364) |
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中文摘要:目的 研究死亡结构域相关蛋白(death domain-associated protein, DAXX)在乳腺癌细胞MCF-7中的表达及核-质定位,并探讨这两者对MCF-7细胞功能的影响。方法 通过构建LV-DAXX-RNAi-GFP干扰与LV-DAXX-GFP过表达慢病毒质粒,转染MCF-7细胞,敲低和过表达DAXX。采用核-质分离法与免疫荧光法验证DAXX在MCF-7细胞中的表达与核-质定位,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,MTT法检测细胞增殖情况。结果 核-质分离法与免疫荧光法均证实DAXX主要定位在MCF-7细胞核,转染LV-DAXX-GFP慢病毒质粒主要上调了MCF-7细胞质内DAXX的表达,而转染LV-DAXX-RNAi-GFP慢病毒质粒则主要下调了DAXX在MCF-7细胞核内的表达;流式细胞术证实下调DAXX的核内表达可以使MCF-7细胞凋亡率上升,细胞增殖受抑,并将细胞阻滞在S期,而上调DAXX的细胞质内表达对MCF-7的细胞凋亡、细胞周期和细胞增殖均无显著影响。结论 DAXX在乳腺癌MCF-7细胞中主要定位在细胞核,DAXX表达于细胞核或者细胞质可能对MCF-7细胞功能有着相反的作用。 |
中文关键词:死亡结构域相关蛋白 乳腺癌 核-质定位 |
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