检测甲型H1N1流感病毒富集方法的初步探索
投稿时间:2010-01-29  修订日期:2010-04-05  点此下载全文
引用本文:李华,柯华昕,龙润乡,杨蓉,何春艳,白慧珠,崔萍芳,谢忠平.检测甲型H1N1流感病毒富集方法的初步探索[J].医学研究杂志,2010,39(6):71-73
DOI:
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作者单位
李华 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所 
柯华昕 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所 
龙润乡 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所 
杨蓉 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所 
何春艳 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所 
白慧珠 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所 
崔萍芳 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所 
谢忠平 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所 
中文摘要:目的探索甲型H1N1流感病毒的富集方法,提高流感病毒核酸检测的灵敏度。方法分别用ProteinA/G及H1N1特异性血清处理流感病毒样品,根据国家流感中心设计的H1N1亚型检测通用引物,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,扩增产物为527bp,来评价病毒的富集效果。结果两种富集方法均能提高检测灵敏度,用ProteinA/G富集处理后检测灵敏度可达10-6,用H1N1特异性血清沉淀富集处理后灵敏度为10-5。结论初步建立的富集甲型H1N1流感病毒方法,有效提高了流感病毒RT-PCR检测的灵敏度,可用于甲型H1N1流感病毒的检测。
中文关键词:流感病毒  甲型H1N1亚型  富集  检测
 
he Primary Exploration of Enrichment Methods for Influenza A (H1N1) Virus
Abstract:ObjectiveTo explore the enrichment methods for influenza A (H1N1) virus and improve the detection sensitivity of the virus nucleotide. MethodsThe influenza A (H1N1) virus samples were enriched by Protein A/G and the specific serum respectively.Universal primers of H1N1 subtype, which is designed by the National Influenza Center were applied in RT-PCR method to evaluate the effect of the virus enrichment. The RT-PCR product was 527bp. ResultsThese two enrichment methods both could improve the detection sensitivity. The detection sensitivity of Protein A/G and H1N1-specific serum enrichment methods could reach 10-6 and 10-5 respectively. ConclusionSuch established enrichment methods for influenza A (H1N1) virus could effectively improve the detection sensitivity of influenza viruses through RT-PCR and could be used to detect Influenza A (H1N1) virus.
keywords:Influenza virus  H1N1 subtype  Enrich  Detect
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